פרישתו של הכהן הגדול לפני עבודת יום הכיפורים נדונה בהרחבה, בעיקר מבחינת המקורות לנוהג זה, האם הוא נלמד מימי הפרישה של אהרן הכהן ובניו בימי המלואים שבחנוכת המשכן או מפרישתו של משה לפני קבלת התורה. The sequestering of the High Priest before the Yom Kippur service was addressed at length. This chapter discussed the source for this practice. There are practical ramifications to the following question: Was it derived from the sequestering of Aaron and his sons during their inauguration before the dedication of the Tabernacle or from that of Moses prior to the revelation at Sinai?
אגב הדיון בשהיית הכהן בלשכת פרהדרין, נתבררה בהרחבה שורת הלכות נוספות שאינן מענין יום הכיפורים. בדיון בהלכות מזוזה, לדוגמא, נקבע אלו הם הבתים, השערים, והחדרים החייבים במזוזה. כיון שהיה משא ומתן מסוים בענין לשכתו של הכהן הגדול, נתגלגלו הדברים לבירור נרחב של מבנה המקדש בכללו, הן מבחינת מבנהו הכללי, והן בסידור הפנימי של הלשכות השונות שבו, על פי שיטות אחדות. Incidental to the priest's stay in the Parhedrin Chamber, a series of additional halakhot unrelated to Yom Kippur were analyzed at length. The Gemara discussed the halakhot of mezuza and determined which houses, gates, and rooms require one. Since there was a discussion of the chamber of the High Priest, the Gemara then analyzed the Temple structure in general, its general parameters and the internal configuration of the various chambers located therein.
ולענינו של הפרק לגופו בתיאור שאר הכנותיו של הכהן הגדול לעבודת היום; כיצד היו מרגילים את הכהן הגדול בעבודות המקדש הרבות והשונות, הזאת מי חטאת עליו כדי לטהרו מכל ספק טומאת מת, והשבעתו שלא ישנה ממסורת ההלכה בשעת עבודתו בקודש הקודשים. צורך זה לדאוג לידיעותיו ולכשרותו של הכהן הגדול בימי הבית השני גרר אתו הבאת דברי הלכה ואגדה על ההבדלים שבין המקדש הראשון והשני בכלל, ובפרט על ההבדל במעלתם של הכהנים הגדולים ששימשו בזה ובזה. The central theme of this chapter is the High Priest's preparations for the Yom Kippur service. The Gemara discussed how the High Priest became accustomed to the numerous Temple services, including the sprinkling of the purification waters to purify him from any possible impurity imparted by a corpse and his oath that he not diverge from halakhic tradition while performing the service in the Holy of Holies. As the Gemara addressed the need to ensure the High Priest's expertise and fitness during the Second Temple period, it then cited halakhic and aggadic statements pertaining to the overall differences between the First Temple and the Second Temple, particularly the difference between the High Priests that served in the two Temples.
ולאחר מכן, תיאור הדברים שנעשו בליל יום הכיפורים עצמו; שמירת הכהן הגדול כל הלילה שלא יישן, כדי שלא יבוא לידי טומאה, וכיצד היו מעסיקים אותו, שלא יירדם, עד לדברים שנאמרו ביחס לזמנה של תרומת הדשן, שאף על פי שנעשתה בלילה, הרי היא מבחינות ידועות תחילת עבודת הקודש שבכל יום. This was followed by a depiction of the activities that were performed on the evening of Yom Kippur itself to ensure that the High Priest not fall asleep and thereby run the risk of becoming impure. Included was a description of how he would be occupied. The Gemara then proceeded to discuss the time for the removal of the ashes, which began the service in the Temple every day.